Comparació de la ICH M10 amb les directrius anteriors de l’EMA i la FDA sobre la validació de mètodes bioanalítics

Tot i que l’ICH ha publicat recomanacions per a la validació dels mètodes analítics utilitzats en l’avaluació de la qualitat dels medicaments i les substàncies actives (ICH Q2) durant més de 25 anys, no ha estat fins fa poc (2022-2023) que hem obtingut una guia harmonitzada que inclogui la validació i l’anàlisi de medicaments i analits en matrius biològiques.

Aquestes matrius, a diferència del que podem trobar en medicaments o productes farmacèutics acabats, presenten una complexitat molt elevada i també una variabilitat individual o interindividual extraordinària. Per aquest motiu, l’ICH M10 és un esforç harmonitzador molt important que ja ha estat adoptat i implementat per la FDA i l’EMA i que està en procés d’implementació per part d’altres organitzacions i administracions reguladores.

Tenint això en compte, els nostres departaments de bioanàlisi, treballant conjuntament amb la nostra Unitat de Garantia de Qualitat, han resumit i sintetitzat els principals punts clau i les diferències respecte a les antigues directrius que tenen un impacte més gran en els estudis bioanalítics.

Introducció i abast

L’ICH M10 descriu la validació del mètode bioanalític que s’espera que doni suport a les decisions reguladores i, en fer-ho, té un abast específic al qual s’apliquen aquestes directrius. Aquests estudis són:

• Estudis toxicocinètics (TK) no clínics i estudis farmacocinètics (PK) realitzats com a substituts d’estudis clínics
• Totes les fases dels assajos clínics en sol·licituds reglamentàries (inclosos els estudis de biodisponibilitat/bioequivalència comparativa (BA/BE)).
• En general, els estudis sotmesos a GLP o GCP

Els biomarcadors estan fora de l’abast de l’estudi tret que siguin el criteri d’avaluació principal de l’estudi. Les matrius biològiques inclouen sang, sèrum, plasma i altres fluids o teixits corporals.

Principis generals

Desenvolupament del mètode

Pel que fa al desenvolupament de mètodes, la nova ICH M10 s’inspira en la majoria de les directrius anteriors de la FDA. El desenvolupament de mètodes ha de definir el disseny, les condicions operatives, les limitacions i l’adequació del mètode per al seu propòsit previst i garantir que estigui llest per a la validació.

Validació completa

L’ICH M10 amplia les guies anteriors de l’EMA i la FDA sobre quan cal una validació completa d’un mètode bioanalític .

Assajos de cromatografia

Validació

La ICH M10 proporciona detalls i directrius addicionals per a cada element de la validació del mètode dels assaigs de cromatografia i amplia i fins i tot crea nous capítols per a alguns d’ells a la nova guia. El nostre equip ha resumit les parts clau i les diferències respecte a les directrius anteriors de l’EMA/FDA:

• La selectivitat s’ha separat de l’especificitat en el nou ICH M10
• Efecte matriu (ME): En relació amb l’efecte matriu, l’ICH M10 ofereix una guia més precisa que les anteriors aprovacions de l’EMA i la FDA, i aconsella la determinació de l’exactitud i la precisió per a cada font/lot de matriu individual avaluat.
• Pel que fa a A&P, l’ICH M10 amplia la base de l’EMA i la FDA i combina algunes de les seves recomanacions. La més important és que les corbes de calibratge per a aquestes avaluacions s’han de preparar utilitzant estàndards de calibratge acabats d’afegir en almenys una execució. Si no s’utilitzen estàndards de calibratge acabats d’afegir en les altres execucions, s’ha de demostrar l’estabilitat dels estàndards de calibratge congelats.
• Estabilitat: L’ICH M10 aprofundeix en el que teníem a les directrius anteriors de l’EMA/FDA i especifica recomanacions per a l’estabilitat de l’analit en matrius biològiques, en mostres processades i en solucions mare i de treball.

Anàlisi de la mostra de l’estudi

L’ICH M10 determina que l’anàlisi de les mostres d’estudi es pot dur a terme després que s’hagi completat la validació (en aquest moment les dades s’han enviat a una autoritat reguladora), però s’entén que alguns paràmetres es poden completar en una fase posterior. L’ICH M10 es manté majoritàriament igual en paràmetres i procediments, amb canvis menors i algunes petites addicions.

Assajos d’unió de lligands

Reactius clau

El nostre equip ha resumit les parts clau i les diferències de les directrius anteriors de l’EMA/FDA pel que fa als reactius clau per als assaigs d’unió de lligands:

• Estàndard de referència: Igual que a l’EMA/FDA, l’ICH M10 no requereix estàndards primaris. La mateixa informació i recomanacions que a les directrius anteriors pel que fa al CoA i la caducitat de l’estàndard de referència, l’ús del mateix lot per a la corba de calibratge i els canvis de lots.
• Reactius crítics: Les recomanacions es basen en l’EMA/FDA, però és important tenir en compte que les proves d’estabilitat d’aquests reactius crítics s’han de basar en el rendiment de l’assaig bioanalític i en les directrius generals per a les condicions d’emmagatzematge dels reactius, i es poden ampliar més enllà de la data de caducitat del proveïdor.

Validació

• Especificitat: L’ICH M10 manté les mateixes recomanacions que tenien l’EMA/FDA pel que fa al procediment i els criteris d’acceptació de l’especificitat, però assenyala que si hi ha reactivitat creuada, cal avaluar-ne l’impacte.
• Selectivitat: L’ICH M10 estableix que la matriu pot contenir components de matriu no específics que poden interferir amb l’analit d’interès. Algunes de les recomanacions ampliades del passat són la selectivitat a l’extrem inferior de l’assaig, els nivells de pic i el nombre mínim de pacients en el cas de poblacions rellevants. Mateixos criteris d’acceptació.
• Corba i rang de calibratge: Pel que fa a la corba i el rang de calibratge, l’ICH M10 es manté principalment igual que les guies anteriors, però també estableix que preferiblement s’ha de preparar utilitzant estàndards de calibratge acabats d’afegir. Mateixos criteris d’acceptació, excepte per punts menors ampliats.
• Exactitud i precisió: La principal diferència en aquests paràmetres és que a l’ICH M10 es recomana que els QC es preparin mitjançant l’addició de la matriu i s’emmagatzemin en les condicions previstes per a les mostres d’estudi. També afegeix un nou nivell de concentració per a la preparació dels QC (mitjà, al voltant de la mitjana geomètrica) i també recomana que l’exactitud i la precisió s’avaluïn utilitzant les mateixes execucions i dades. Els criteris d’acceptació es basen en l’EMA i la FDA.

• Linealitat de la dilució i efecte ganxo: Podem trobar les mateixes recomanacions que a l’EMA/FDA (harmonització d’ambdues), amb petites addicions. Pel que fa als criteris d’acceptació, l’ICH M10 recomana que el(s) factor(s) de dilució aplicat(s) durant l’anàlisi de la mostra de l’estudi estiguin dins del rang dels factors de dilució avaluats durant la validació.
• Estabilitat: La norma ICH M10 estableix que l’estabilitat ha de cobrir les condicions de processament i emmagatzematge, i que les mostres d’estabilitat han de cobrir tot el rang de concentracions de les mostres d’estudi. Per als fàrmacs biològics, la nova guia afegeix que és acceptable aplicar un enfocament de classificació (entre temperatures de dos punts), i pel que fa al procediment i als criteris d’acceptació, les recomanacions són les mateixes harmonitzades.

Anàlisi de la mostra de l’estudi

• Execució analítica : La composició de l’execució i la col·locació dels QC a l’execució és la mateixa que a l’EMA/FDA, i quan s’analitza més d’una placa, cada placa ha de contenir un conjunt individual d’estàndards de calibratge i QC.

Un punt clau de l’ICH M10 és que els QC han de cobrir el rang de concentració esperat de la mostra d’estudi. També s’assenyala que es permet fer anàlisis de pou únic (tant les mostres de validació com les d’estudi).

Pel que fa a la corba de calibratge i els criteris d’acceptació, l’ICH M10 és una harmonització tant de l’EMA com de la FDA, i la precisió i exactitud mitjanes globals dels controls de qualitat de totes les execucions acceptades s’han de calcular a cada nivell de concentració i s’han d’informar a l’informe analític.

• Reanàlisi de mostres d’estudi : Per les raons, els criteris i el nombre de mostres per a la reanàlisi, les recomanacions són les mateixes que a l’EMA/FDA. La ICH M10 estableix que l’anàlisi de les mostres s’ha de basar en el mateix nombre de pous per mostra d’estudi que en l’anàlisi inicial.

Reanàlisi de mostres incorregudes (ISR)

Segons la norma ICH M10, l’ISR té com a objectiu verificar la fiabilitat de les concentracions d’anàlits de la mostra notificades i s’ha de realitzar en les situacions que s’especificaven tant a l’EMA com a la FDA i que ara estan combinades i harmonitzades en la nova guia. Els estudis, les xifres, les seleccions de mostres i el càlcul no han canviat.

Conclusions

Com es pot veure en aquest text resumit, l’ICH M10 presenta un marc harmonitzat per a estudis bioanalítics que ja està implementat per la FDA i l’EMA i s’ha convertit en l’estàndard a l’hora d’analitzar fàrmacs i analits en matrius biològiques.

Des de la nostra adaptació a aquesta nova directriu, hem rebut comentaris molt positius dels nostres clients sobre aquesta nova versió dels protocols de validació i els protocols d’anàlisi de mostres, cosa que confirma el compliment dels nostres mètodes i procediments amb la norma ICH M10.

Si necessiteu més informació sobre aquesta nova directriu o ajuda amb els vostres projectes, poseu-vos en contacte amb quotes@kymos.com . Estarem encantats de proporcionar-vos assessorament i suport detallats.