La seguretat microbiològica dels productes biològics és un pas crític al llarg del desenvolupament, la fabricació i l’alliberament de lots. Els productes biològics requereixen una estratègia d’assaig integral que verifiqui l’absència de contaminació microbiana alhora que demostri el compliment dels requisits farmacopeics i reguladors internacionals.
Una estratègia integral de control microbiològic és essencial per avaluar els riscos potencials de contaminació en les diferents etapes del desenvolupament i la fabricació del producte. A Kymos Group, el nostre laboratori de microbiologia amb certificació GMP dona suport a aquesta estratègia amb serveis de control de qualitat microbiològic per a productes biològics, teràpies cel·lulars i gèniques, vacunes i altres productes farmacèutics estèrils i no estèrils.
Un enfocament complet
La seguretat del producte depèn d’una combinació d’assaigs que avaluen els riscos de contaminació en les diferents etapes de fabricació i control de qualitat.
Aquestes avaluacions microbiològiques sovint es realitzen juntament amb les anàlisis de control de qualitat fisicoquímics i analítics, proporcionant un enfocament integrat per a la caracterització del producte i l’alliberament de lots.
Càrrega microbiana (Bioburden)
(D’acord amb Ph. Eur. 2.6.12; USP <1119>)
L’assaig de càrrega microbiana (bioburden) determina la població total de microorganismes viables presents en matèries primeres, API o productes acabats abans de l’esterilització o el processament asèptic. És una mesura de control de qualitat crítica utilitzada per avaluar l’estat microbiològic dels processos de fabricació. El monitoratge rutinari dels nivells de bioburden garanteix que els processos es mantinguin sota control i dona suport a la validació i l’eficàcia continuada dels procediments d’esterilització.
Assaig de límits microbiològics: TAMC, TYMC i microorganismes específics
(D’acord amb Ph. Eur. 2.6.12/Ph. Eur. 2.6.13; USP <61>/ USP <62>)
A diferència de l’assaig de bioburden, l’assaig de límits microbiològics s’utilitza per a productes farmacèutics no estèrils per avaluar la qualitat microbiològica del producte i verificar que la població microbiana es manté dins dels límits acceptables definits per les farmacopees pertinents.
L’assaig inclou:
- Recompte total de microorganismes aeròbics (TAMC): enumeració de bacteris aeròbics.
- Recompte total de llevats i motlles (TYMC): enumeració de llevats i fongs filamentosos.
- Detecció de microorganismes específics, com ara Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Salmonella spp., Candida albicans o bacteris gramnegatius tolerants a la bilis, segons la categoria del producte i la via d’administració.
Assaig d’esterilitat
(D’acord amb Ph. Eur. 2.6.1, USP <71>)
L’assaig d’esterilitat confirma l’absència de microorganismes viables en productes destinats a ser estèrils. Realitzat en condicions asèptiques estrictament controlades, és un assaig de control de qualitat crític i un requisit clau per a l’alliberament de lots de productes biològics estèrils i productes injectables.
Per a l’assaig de productes estèrils, el nostre laboratori de microbiologia inclou una sala blanca dedicada equipada amb dos aïlladors de 4 guants, una bomba Steritest® Symbio® i un sistema de biodecontaminació per H₂O₂. Aquesta tecnologia avançada d’aïlladors minimitza el risc de contaminació externa alhora que garanteix un assaig d’esterilitat fiable d’acord amb els requisits farmacopeics.
Assaig d’endotoxines bacterianes
(D’acord amb Ph. Eur. 2.6.14; USP <85> i <86>)
Les endotoxines bacterianes, originades a la membrana externa dels bacteris gramnegatius, poden romandre presents fins i tot després d’haver eliminat els microorganismes. Si s’administren als pacients, les endotoxines poden induir reaccions pirogèniques greus, fet que fa que la seva detecció sigui essencial per als productes mèdics, especialment els productes biològics parenterals.
La selecció d’un mètode de detecció d’endotoxines adequat depèn de les característiques del producte i dels requisits aplicables. Hi ha múltiples metodologies validades disponibles, incloent-hi:
- LAL cromogènic cinètic
- LAL turbidimètric cinètic
- Assaig de gelificació (Gel-clot)
- Reactiu de cascada recombinant (rCR)
Detecció ràpida de micoplasmes mitjançant qPCR: detecció precoç per a millors decisions
A més dels mètodes microbiològics convencionals, els enfocaments moleculars poden proporcionar una detecció més ràpida de contaminants específics. La detecció ràpida de micoplasmes mitjançant qPCR és especialment valuosa per al monitoratge de cultius cel·lulars, bancs de cèl·lules, vectors virals i altres productes biològics, permetent la detecció precoç de la contaminació.
A Kymos, disposem de detecció de micoplasmes basada en qPCR que compleix les GLP per donar suport a les activitats de desenvolupament.
En comparació amb els mètodes tradicionals basats en cultius, la qPCR ofereix:
- Resultats en hores en lloc de diverses setmanes
- Alta sensibilitat i especificitat analítica
- Detecció precoç de la contaminació
L’adopció creixent de les tècniques d’amplificació d’àcids nucleics (NAT), inclosa la qPCR, es reflecteix en les guies farmacopeiques actuals. El capítol revisat de la Farmacopea Europea “2.6.7 Micoplasmes” reconeix els mètodes validats basats en NAT com a part del marc regulador per a la detecció de micoplasmes, mentre que el nou ”USP <77> Proves d’amplificació d’àcids nucleics per a micoplasmes” proporciona orientació per a la validació i aplicació de mètodes NAT qualitatius. Aquestes revisions destaquen l’acceptació creixent de les tecnologies basades en PCR per a la detecció de micoplasmes quan es validen adequadament per al seu ús previst.
Serveis integrats de microbiologia GMP per a productes biològics
Garantir la seguretat microbiològica dels productes biològics requereix més d’un únic assaig. La combinació adequada de mètodes microbiològics i moleculars depèn del producte, el procés de fabricació, l’etapa de desenvolupament i els requisits reguladors aplicables.
El nostre laboratori de microbiologia combina instal·lacions d’última generació, personal altament especialitzat i una àmplia experiència reguladora per donar suport als fabricants al llarg del cicle de vida del producte, des del desenvolupament del procés i la transferència de tecnologia fins a la validació de mètodes, els estudis d’estabilitat i l’alliberament de lots comercials.
Aquest enfocament integrat ajuda a garantir que els riscos microbiològics s’avaluen, es monitoren i es controlen eficaçment, alhora que es dona suport al compliment dels requisits internacionals de GMP, l’alliberament fiable de productes i, en última instància, la seguretat del pacient.
