2024 年 6 月，FDA 发布了题为“《寡核苷酸疗法开发中的临床药理学考虑：行业指南》”的最终版本。该文件取代了 2022 年的草案，并为协助行业开发寡核苷酸疗法提供了建议，但也为开发商和制造商带来了新的挑战。
此前，Kymos 核酸部门经理 Maria Fauth 分享了她在 2022 年实施该指南草案的经验，现在我们的团队修订了这一最终版本，并就其中最关键的方面及我们的经验编写了摘要。
寡核苷酸疗法与新指南
寡核苷酸疗法通过 RNase H 介导的切割靶向降解、剪接调节、非编码 RNA 抑制、基因激活和程序化基因编辑来调节基因表达，从而治疗特定的病症或病理 (1)。近年来，寡核苷酸疗法的发展不断兴起，这些疗法和新型药物包括反义寡核苷酸 (ASO)、siRNA、anti-miRs 或 antagomirs（抗 miRNA 寡核苷酸）、适配体、成簇规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 和化学修饰的寡核苷酸 (1,2)
自 2020 年初以来，多种寡核苷酸疗法已获得 FDA 批准。尽管如此，这些疗法的广泛应用仍面临一些挑战，其中最显著的是：实现除肝脏以外的靶组织的有效递送，以及存在一些相互作用和毒性 (1,3)。
幸运的是，FDA 最近发布了 《寡核苷酸疗法指南》的最终版本，强调了在开发这些新疗法时的以下考虑因素：
- 表征 QTc 间期延长和促心律失常潜力（由临床中心评估）
- 进行免疫原性风险评估
- 表征肝肾功能损害对药代动力学、药效学和安全性的影响。
- 评估药物相互作用的考虑因素。
Kymos 集团在核酸领域的经验
Kymos 核酸部门在不同核酸和寡核苷酸疗法的生物分析方面拥有广泛的经验，甚至自 2016 年起就率先开展了 miRNA 生物分析定量工作。我们的部门由 Maria Fauth 领导，在从零开始开发方法方面拥有专业知识，最重要的是，自 2022 年草案发布以来，他们一直在符合 GLP 标准的分析方法验证中实施 FDA 指南，并始终关注 FDA 的任何最新动态。
基于这些当前的指南考虑因素并利用尖端技术，Kymos 能够在以下方面提供专业知识：
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免疫原性评估：
正如指南中所述，寡核苷酸疗法可能由于不同原因产生不必要的免疫反应，在制造过程中必须考虑这些原因，并按照基于风险的方法进行测试，并纳入 FDA 指南 《治疗性蛋白产品的免疫原性评估》（2014 年 8 月）中所述的产品特定免疫原性风险评估中。
寡核苷酸疗法的免疫原性临床评估通常包括 FDA 的多级方法，Kymos 多年来一直遵循该方法，正如 FDA 指南《治疗性蛋白产品的免疫原性测试——开发和验证抗药物抗体检测分析》（2019 年 2 月）中所述。Kymos 可以通过使用电化学发光（ECLA- MSD®）和基于细胞的分析来测定 结合 ADA 以及中和 ADA。
此外，新的 FDA 指南提到，在适当情况下还应测量不必要的先天免疫激活，例如，应测量包括寡核苷酸疗法诱导的细胞因子释放在内的先天免疫激活。通过使用多重 MSD® 和 Luminex® 技术，Kymos 能够在同一样本中同时检测多种细胞因子和生物标志物，从而减少时间、成本和宝贵的样本量。
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生物分布和药代动力学：
如前所述，寡核苷酸疗法向靶组织的递送以及肝脏蓄积是一项重大挑战。Kymos 可协助提供符合 GLP 标准的药物分布和药代动力学结果。我们的核酸部门已通过 qPCR 和 RT-qPCR 进行了多次生物分布、散毒和基因表达测定。我们精通在不同且复杂的基质中开发方法。我们使用 Phoenix WinNonlin® 8.2 黄金标准软件提供 药代动力学计算和统计。
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评估药物相互作用：
寡核苷酸疗法主要由核酸酶代谢，不依赖于细胞色素 P450 (CYP) 酶。因此，它们的药代动力学不受 CYP 酶诱导剂或抑制剂的显著影响。寡核苷酸疗法诱导或抑制 CYP 酶或转运体的潜在药物相互作用在早期药物开发中进行体外评估。寡核苷酸疗法通常对 CYP 酶的影响极小。尽管如此，可能需要根据化学修饰和递送类型进行特定评估。在此阶段，Kymos 可以支持通过酶活性分析和 mRNA 表达水平进行的 CYP 诱导和抑制评估。
结论
寡核苷酸疗法领域在过去几年中一直在增长，迅速成为多种复杂病理的有前途的治疗方法。这些先进的治疗方法目前正在不断开发和制造，因此监管机构正在提供此类指南，以确保公众的有效性和安全性。
Kymos 很乐意在您的寡核苷酸治疗开发流程中为您提供加入和协助。我们很自豪能够及时了解 FDA 提供的与寡核苷酸疗法相关的最新指南的实施情况，并能够将我们在所需测定方面的专业知识交到您的手中。
如果您需要有关这些进展的更多信息或对您的核酸项目有任何协助需求，请联系 commercial@kymos.com。我们将很高兴为您提供详细的咨询和支持。
参考文献
- Roberts, T; Langer, R and Wood, M. 寡核苷酸药物递送的进展。 (2020). Nature Reviews Drug Discovery 第 19 卷，第 673–694 页 (https://www.nature.com/articles/s41573-020-0075-7)
- Krützfeldt, J. 等 (2005) “利用 antagomirs 在体内沉默 microRNA”。Nature 438, 685–689.
- Gagliardi, M 和 Ashizawa, A.T. (2021). 反义寡核苷酸药物递送的挑战与策略。Biomedicines 16;9(4):433. doi: 3390/biomedicines9040433 (https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC8072990/)
